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常州百代生物科技有限公司

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常州百代生物--荧光定量PCR技术服务
发布时间:2016-10-10        浏览次数:260        返回列表

           荧光定量PCR技术服务

     荧光定量PCR 实时荧光定量PCR技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法,目前在基因表达研究和临床疾病检测等领域已得到广泛应用,常州百代生物使用SYBR Green法或者Taqman 法对 DNA/RNA 进行定量测定或型的鉴定。

SYBR Green荧光染料法:适用于任何DNA,无需设计探针,采取双标准曲线法,实验周期短,结果重复性好,灵敏度高。

TaqMan荧光探针法:经验丰富的实验技术人员设计探针,对目标基因有高特异性,实验重复性好,相对于SYBR Green法,灵敏度更高。

服务流程
1、根据基因序列设计特异性的引物或荧光探针
2、提取样品 DNA/ RNA、电泳、反转录
3、荧光定量PCR,进行扩增曲线、溶解曲线、表达量差异分析等实验
4、实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料

荧光定量PCR服务要求:
1. 请您提供新鲜的且尽量多的材料(各种材料的RNA提取量请参照“总 RNA 的提取”),或直接提供纯化好的总RNA(大于5 ug/样品);(各种材料的DNA提取量请参照“DNA的提取”),或直接提供纯化好的DNA(大于5ug/样品) 。
2. 请通过E-mail提供已知的全长基因序列。
3. 请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA来源 、丰度等

样品类型

细胞

组织

全血

血浆

RNA

DNA

样品最少量

106

100mg

500ul

500ul

5ug

5ug

推荐保护剂

Trizol

Trizol

肝素

柠檬酸

Rnase-Free水

运输条件

液氮/干冰

干冰

干冰

干冰

干冰

冰袋

荧光定量PCR操作程序:
1. 根据基因序列设计特异性的引物和荧光探针。
2. 提取DNA/RNA 。
3. Real Time PCR(荧光定量PCR),进行实验结果分析
4. 实验完成后,提供完整的实验报告(含软件分析结果)及引物等实验材料